pHAb 染料是一種 pH 敏感性染料,專為抗體標記設計,具有 2 種活性形式可用。在 pH 值 >7 時熒光信號很低,在溶液 pH 值變?yōu)樗嵝詴r,熒光信號值會急劇增高。pHAb 染料的******激發(fā)波長為532nm, 發(fā)射波長為 557nm。 pHAb Amine 活性染料具有生物素琥珀酰亞胺酯基團,能夠與抗體中賴氨酸上的伯胺基反應。pHAb Thiol 活性染料具有馬來酰亞胺基團,能夠與硫醇反應。還原劑如 DTT 或 TCEP 處理抗體,使抗體鉸鏈區(qū)的半胱氨酸二硫鍵還原為硫醇后,這種馬來酰亞胺pHAb 染料的關鍵特點是每個染料都有 3 個磺化基團,能夠增加可溶性并降低非磺化染料常見的聚集現象。即使在與抗體結合后,pHAb 染料仍保持有對 pH 變換的反應。 雖然抗體標記是 pHAb 染料的主要的應用,但是任何帶有賴氨酸伯胺基或者半胱氨酸硫醇的蛋白均可結合 pHAb 染料。